在Covid-19之前,大流行准备的想法远非大多数人的思想,但是大流行准备一直是研究人员多年来的热门话题。
作为一部分达帕-大流行预防平台(P3)计划,范德比尔特疫苗中心(范德比尔特大学医学中心的一部分)一直在努力通过开发抗体治疗来快速应对流行病。
在2018年中,他们开始研究单克隆抗体的开发,以治疗和预防传染病,以及一种大幅度减少识别和评估高度有效抗体所需时间的方法的潜力。
他们的方法依赖于生物信息学和合成生物学技术,还解决了基于大规模抗体的最大障碍:递送和时间。该理论不是静脉注射抗体,而是将编码所需抗体蛋白的信使RNA递送给患者,将其细胞转变为抗体工厂。
而且他们并不是一个人做。大型病毒学社区内的合作,包括圣路易斯的华盛顿大学,北卡罗来纳大学教堂山分校以及其他机构,引发了有关共享细胞和技术的对话,以及如何共同努力以开发抗体发现程序并将其进入诊所。
该过程涉及从Covid-19中幸存并现在免疫的人那里获得血细胞。通过涉及血液样本中记忆B细胞(免疫系统的抗体制造细胞)选择性隔离的多步骤,科学家使用编码的基因的高通量测序,用于抗体的轻和重链对。
使用复杂的生物信息学方法,鉴定并合成了这些抗体轻和重链基因对的序列,这些抗体光和重链基因对最有可能编码针对病毒的功能抗体。然后将这些基因以小规模表达和制造成抗体蛋白,并测试了病毒中和作用。该过程可以产生数百种需要分别评估病毒中和活性的抗体分子。此过程的最后一步是使这些抗体的信使RNA表现出病毒中和活性,并将其注射到表现出疾病症状的患者中。通过允许患者自己的细胞制造针对病毒的抗体,该策略规避了对抗体进行大规模制造的需求,这可能需要大量的时间和面临调节性和后勤障碍。
在该程序的各个不同阶段中,还使用了其他领先技术。雷竞技raybetAgilent Xcelligence实时电池分析(RTCA)平台,由Acea Biosciences开发,现在是Agilent的一部分。雷竞技raybet准确的病毒活性测量对于病毒疫苗发育和传染病研究起着至关重要的作用。Xcelligence系统用于以高通量和定量方式筛选开发的抗体,以识别病毒并抑制细胞培养中的病毒感染过程,称为细胞病变作用(CPE)。
细胞培养中的病毒CPE涉及宿主细胞的许多变化。这些变化包括细胞收缩或扩大,恶化/裂解,细胞融合以及包容体的形成。并非所有病毒都会在其宿主细胞中引起CPE,但是如果这样做,它可能是各种研究应用的有用工具,包括从病毒滴度确定到检测和量化中和抗体的所有方法。
XCelligence系统可以自动监测CPE,从而排除了使用劳动密集型方法的需求,例如手动计算病毒感染形成的斑块。此外,由于该乐器位于CO内2孵化器,它在处理高度传染性病毒时提供了更安全和安全的环境。这种和其他分析最终可以将候选池从数百种抗体中带到少数。然后将这些抗体净化并发送给大学合作者,以识别其中最有效的。
遏制Covid-19的持续挑战增强了对安全有效的疗法进行大规模和及时部署的需求,这些疗法可以为全球广泛的人口提供有效的免疫力。只有通过跨政府,工业界和科学界的伙伴关系,合作和沟通以及对尖端创新和技术的利用,才能实现这一范围的努力。
病毒研究补助计划
Acea Biosciences是Agilent的一部分雷竞技raybet,致力于支持病毒学和疫苗研究。他们目前正在接受Xcelligence Research Grant on病毒学申请。
在六个月的时间里,将提供研究赠款冠军:
- Xcelligence实时电池分析仪器
- 消耗品
- 咨询
提交必须在2020年5月29日之前收到。访问Xcelligence研究赠款计划网站提交您的申请并了解更多信息。
支持资源:
- Branche,E。等。人类多克隆抗体可预防小鼠致命的寨卡病毒感染。SciRep。2019卷8:9857
- Charretier C.等。强大的实时细胞分析方法,用于确定病毒疫苗生产过程中的病毒感染滴度。病毒学方法杂志。2018卷252:57-64
- 大流行预防平台(P3)