要做什么如果我LC-QQQ自动调谐失败?

回答

这个信息适用于:雷竞技raybet安捷伦6400系列三重四极LC / MS系统

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问题

自动调谐未能完成。

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背景

雷竞技raybet安捷伦6400 LC / MS系统使用一个自动调谐算法来优化仪器的灵敏度和质量分辨率。有时自动调谐程序运行时自动调谐不完整和用户给出MassHunter自动调谐失败的消息。自动调谐失败的主要原因之一是缺乏敏感性或优化离子丰度。本文通过一些简单的检查,一个用户可以尝试让仪器通过自动调谐。

项目所需的

• 喷雾器调整夹具(p / ngt430 - 20470)或喷雾器调整工具(p / ng1960 - 67470)- - -在必要时检查和调整喷雾器针。
• 清洁无粉手套
• 正确的调优应用程序解决方案
  • ESI /地方优化组合(p / ng2421 - 60001)
  • APCI-L低浓度混合调优(p / ng1969 - 85010)
  • 多模MMI-L低浓度混合调优(p / ng1969 - 85020)
• T6内梅花头螺钉司机或1.5毫米六角扳手。
• 1/4“x 5/16“开口扳手(数量2)

决议/步骤

1. 检查具体的自动调谐过程中,发生了故障。自动调谐的时候失败,错误消息显示在进度框的右下角部分自动调谐窗口(见红盒子图1)。
   • 如果你错过了错误消息在屏幕上,然后打开AutotuneLogFile。你MassHunter csv文件中找到调优文件夹中。默认路径是D: \ MassHunter \ \调\ G64格格不入xx,在那里xx是你的LC / MS模型的最后两个数字号码。滚动到excel文件结束的时候和自动调谐的原因失败应该列出。
   • 自动调谐故障一般分为以下主要类别之一,注意的原因失败然后继续步骤2:
     
     1. 失败是由于低丰度的一个或多个calibrant离子——检查正确的优化解决方案是用于在您的系统上安装源,和内部的解决方案是使用日期。确保足够数量的优化解决方案是在调整瓶完成自动调谐过程(15-20mL需要)。看到项目所需的部分正确的调优解决方案为您的应用程序,安装源,还和电离类型和检查到期日期不优化的解决方案。
     2. 不正确的m / z任务——可能是由于污染的优化解决方案,calibrant交付的源或离子光学系统或LC / MS。也可以造成一个问题与四极控制电子或可由于低或波动期间丰富的调优离子m / z任务。
     3. 峰宽的宽容——可能是由于一个问题与四极控制电子或可由于低或波动期间丰富的调优离子m / z任务。
     4. 电子倍增器电压(EMV)调整失败了——可以表明一个电子倍增器的可用的生活。检查EMV值在最后自动调谐,通过仪器,如果接近或价值3000 V,他们可能需要更换。这个错误也可能是由于离子丰度低的调优。

        
        
        图1——自动调谐窗口显示在红色框自动调谐进展。
        

2. 检查喷雾器喷雾——适当的喷雾器喷雾需要良好的信号,是安捷伦急流(能)装备的关键来源。雷竞技raybet喷雾模式应该锥形形状和一致的。如果喷雾形状看起来好和你越来越calibrant喷雾器,然后搬到步骤3。
   • 检查喷雾形状,去手动调整窗口打开calibrant,并确保信用证流程会浪费使用单选按钮在你的曲调MassHunter的视图。遵循本文中的指令检查喷雾形状:如何检查和调整喷雾器针安捷伦LC / MS系统雷竞技raybet。
     • 如果不是锥形或喷雾形状一致,然后本文还提供说明如何检查和调整你的喷雾器针,以确保高效的雾化和电离。
   • 如果喷雾器针调整看起来好,但你没有得到任何喷雾,或喷不同意的:
     1. 穿上无粉丁腈手套
     2. 删除PEEK的手指紧装配的喷雾器(见图2)。地方的出口毛细管在干净的烧杯或类似的观察滴calibrant走出毛细管。您应该看到一滴校准解决方案每6到8秒。
     3. 如果没有流,或者流量明显低于这个,你在cd系统堵塞,或calibrant瓶子不是加压。请联系你当地的安捷伦服务代表,与他们分享你的发现。雷竞技raybet

        
        
        图2皮,红色框所示所示,检查滴calibrant步骤2
        
        

3. 如果喷看起来好,检查真空系统和比较当前真空读数到最后好自动调谐报告同样的仪器。如果喷雾形状和真空读数看起来好,或者一旦你这一步然后继续执行步骤4。
   
   
   • 如果粗糙的真空太好了(即托值低于正常),然后离子毛细管可能被堵死了。
     1. 说明去除离子毛细管清洁可以找到在这里标准6400系列仪器,在这里或LC / MS系统配备了闸阀离子毛细管删除没有发泄的工具。
   • 如果粗糙的真空不够好(即。,higher Torr value than normal), it could indicate one of the following: Gross vacuum leak, low oil level (check MS40+ oil level在这里)、干燥气体流或温度不足或有缺陷的粗糙的泵。
     1. 收集所有的观察,再加上过去好checktune和自动调谐报告生成的乐器。
     2. 联系你当地的安捷伦服务代表为进一步援助雷竞技raybet。
   • 如果高真空太好(托值低于正常),它可以表明碰撞单元气体流量不足。
     1. 关掉碰撞气体使用碰撞单元气体在手动调整窗口”复选框。
     2. 等待新的高真空读数稳定和记录这个值。
     3. 然后再打开碰撞细胞,再次等待高真空稳定,记录高真空读数一次。
     4. 联系你当地的安捷伦服务代表,这些值可以雷竞技raybet提供进一步的援助服务代理。
   • 如果高真空不够好(托值高于正常),它可以显示太多的碰撞细胞气体流量、真空泄漏,或失败的涡轮泵。
     1. 比较真空读数和克里森细胞气体。
     2. 联系你当地的安捷伦服务代表和你观察任何雷竞技raybet潜在的泄漏和真空值准备提供进一步的援助服务代理。
        
4. 比较当前优化设置最后好自动调谐的报告确保没有改变在当前优化文件,会导致与优化问题。如果没有主要的调优参数差异明显,尤其是在源的值温度,气体流动,和电压设置,然后继续步骤5。
   
5. 试图加载最后自动调谐检查一个问题或腐败与当前优化文件。
   1. 点击手动MassHunter曲子的曲调选项卡视图。
   2. 单击文件Subtab然后单击负载按钮,弹出一个可用的音乐列表加载。
   3. 选择最后一次正确的自动调谐系统,当仪器调成功。自动调谐文件在以下格式显示日期和时间自动调谐时完成(Autotune_ <日期> _ < atunes_backup _ <日期> _ <时间> .TUNE.XML)
   4. 最后一个好自动调谐文件加载到内存中,然后单击自动调谐开始一个新的自动调谐过程使用最后一个好作为起始参数自动调谐。
   5. 观察自动调谐过程中,如果不能再然后检查失败的新原因,比较旧的自动调谐失败的原因。继续步骤6
      
6. 试图执行一个只在一个极性模式下自动调谐——大多数LC-QQQ设置在正负极性自动调谐模式。
   1. 仅试着或正面或负面的自动调谐模式(图2)。是有用的知道只有一个极性模式是失败的。例如,积极的模式可以失败由于污染,干扰和/或离子抑制,可能不会出现在负模式。
   2. 记录模式通过或失败,然后继续步骤7。
      
7. 做一个自动调谐从工厂默认值。
   1. 点击自动调谐MassHunter调整视图选项卡。
   2. 旁边的复选框从工厂默认值(图3)
   3. 单击自动调谐按钮来启动一个自动调谐使用出厂默认值的参数。
   4. 如果这个自动调谐也失败了,继续步骤8。
      
8. 获得MS1和一份扫描而注入calibrant进一步问题分析。
   1. 然后单击最大化你MassHunter窗口手动调整在MassHunter调整视图选项卡。(图4)
   2. 单击MS1Subtab。
   3. 在扫描类型,选择MS1扫描。
   4. 在MS1参数部分,确保扫描范围设置为全质量范围可供你的LC / TQ操作模型。通常扫描50 - 2250 m / z是足够的(图4)
   5. 打开calibrant(复选框),并检查LC流将浪费(设置LC >浪费)
   6. 点击应用启动MS1扫描。等待几分钟扫描信号稳定,然后将整个窗口的屏幕截图显示结果和MS1选项卡参数。
   7. 重复步骤5 f一份扫描Subtab运行一份扫描的结果的截图。
   8. 发送截图和其他观察和真空读数当地安捷伦服务代表为进一步援助。雷竞技raybet

图3——开始恢复出厂设置的自动调谐参数,检查环绕从工厂默认值框,然后单击自动调谐按钮。

图4截图的手动调整选项卡显示MS1 subtab设置(红色部分所示)。

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