创建一个方法MassHunter定量分析“Quant-My-Way”用户界面

回答

这个信息适用于:雷竞技raybet安捷伦MassHunter定量分析“Quant-My-Way”用户界面(B.09.00或更高版本)

问题

在批处理数据文件并获得定量结果,您必须创建一个新的定量方法或者使用以前的定量方法,然后应用于批处理。

步骤

1。创建一个新的批处理和添加适用的数据文件(添加样品)开始定量分析然后最初保存批。指如何创建一个新的批处理在安捷伦MassHunter定量分析雷竞技raybet创建一个新的批处理。

2。批表定义校准标准,设置类型来卡尔并设置水平(水平ID)在批处理(见表图1)。

的水平(水平ID)如果设置为一个数字还将设置的数值浓缩的。字段的化合物水平在校准表如果水平包含文本的数字值浓缩的。字段的化合物水平将被设置为1.00。

图1所示。批表

3所示。同时还在e批视图中,选择一个代表性的校准标准,明白了图1。作为一个例子所选的校准标准数据文件STD3。常见的做法是选择一个中档校准标准。

选择方法使用手工设置> New >新方法在主屏幕(见的定量分析图2)切换到编辑视图的方法。

图2。创建新方法的选择

4所示。使用样品信息窗口的方法编辑视图方法手动添加新的化合物。

。变焦(右键单击并拖动)感兴趣的第一化合物色谱。

b。Left-double-click峰值顶点得到顶点保留时间和频谱。

c。变焦(右键单击并拖动)量词离子周围的频谱,左击量词离子选择离子的正上方的量词。离子将被贴上一个蓝色的三角形。

d。右键单击蓝色的三角形和选择新的化合物。

e。复合名称在复合设置表中。

f。变焦(右键单击并拖动)在预选赛离子谱,左击预选赛离子选择离子的正上方的限定符。离子将被贴上一个蓝色的三角形。

g。右键单击蓝色的三角形和选择新的限定符-重复步骤f和g .剩下的限定符。

请注意:如果数据收购在扫描模式和样本信息窗口包含总离子色谱图(TIC)步骤4后,b。你可以在光谱上单击右键并选择搜索库对一个大型商业图书馆搜索库(例如NIST17.L)或创建一个特定于应用程序的用户库协助确认高峰的身份。

重复上面的步骤来添加这个校准标准的所有化合物(点击样本信息区域,单击双头箭头图标来放大窗外,然后继续创建另一个化合物),或看到(见以下视频创建新的化合物图3)

图3。视频-方法编辑视图中创建新的化合物

请注意:高度复杂的色谱选择色谱峰的顶端可以生成一个谱系coeluting或重叠的化合物,离子从一个以上的化合物,如果图书馆搜索可能提供模棱两可的结果(扫描模式数据)。尝试从几个峰宽度左击并拖动到几个峰宽度后的色谱峰选择一个时间范围(蓝色高亮显示),然后右键单击,并选择反褶积。

如果有一个以上的化合物有几个独特的离子选择时间范围应该生成多个保留时间和Deconvoluted光谱。这些光谱可以然后图书馆搜索协助确认这些deconvoluted色谱峰的身份。的离子存在于每个deconvoluted光谱相对独特的特定deconvoluted化合物保留时间和可能提供量词和限定符离子选择用更少的重叠复合干扰。

图4演示如何创建一个新的化合物的高度复杂的色谱使用反褶积:

使用MassHunter \ Data \ QuantExample \ \美国之音\ CAL_L07女士。D TIC数据文件/扫描峰值为10.337分钟以下的例子。

当四氯化碳和苯混合光谱库搜索对NIST17混合匹配的匹配因素~返回63年到65年的这两个化合物。

反褶积后你应该得到两个化合物。

峰尖10.326 RT四氯化碳/匹配因素96。
峰尖在RT 10.342苯/匹配因素99。

图4。视频Co-eluting /重叠复合反褶积

5。复合设置从步骤4——创建了所有参数。(见图5)。

默认设置的审查标准的关闭RT适用于您的应用程序或实验室协议。

标准(峰值选择标准)代表排名逻辑选择集成量词的峰值信号作为主要打击(最高排名)。

最大的响应排名综合量词的峰值信号的最大响应,决定主(顶部,排名),不论存在,质量和忠诚集成预选赛信号的比率。

关闭RT排名综合量词的峰值信号接近预期的保留时间,决定主(顶部,排名),不论存在,质量和忠诚集成预选赛信号的比率。

密切的RT限定符排名综合量词的峰值信号最亲密的保留时间与预期综合预选赛信号峰值比限制了决定的主要打击(最高排名)。如果没有集成量词信号峰值与预期预选赛峰值比率限制了排名将相当于关闭RT。

最大的核反应能量排名综合量词的峰值信号的最佳匹配预期综合预选赛QVALUE信号峰值比率。QVALUE的存在,质量和忠诚集成预选赛信号的比率。

图5。复合表

6。限定符设置,从第4步创建了所有参数。(见图6)。

不确定性类型——比例的不确定性,设置为相对或绝对的不确定性。

例如,80%的相对灵敏度,20%的不确定性。

绝对= = 80% + / - 20%范围的60 - 100%。

相对= 80% + / -((80 * 20)/ 100)% = 96%至64的范围。

Rel。职责。- - - - - -预计预选赛离子反应定量离子的百分比。

不确定性-价值- + / - %限制范围。

图6。限定符设置

7所示。保留时间的设置——创建了所有参数从步骤4,除了左/右RTδ,这是设置为默认,+ / - 1.000分钟(见图7)。

RT预期的化合物的保留时间

离开RTδ——信号基线之前预期的RT的化合物

对RTδ——信号基线后的预期RT化合物

RT三角洲部队

分钟分钟(例如复合AA在7.56分钟的+ / - 1.00分钟提取的信号将会从6.56到8.56分钟。)

百分比——比例(如复合AA在7.56分钟,+ / - 10%提取的信号将会从6.804到8.316分钟。)

分钟将色谱相似的色谱峰宽度通常设置在程序升温气相色谱法等色谱分离。

百分比将色谱与通常的设置提高色谱峰宽度在等温气相色谱分离的色谱等。

定义的复合RT窗口左/右RT三角洲,和需要宽足以允许集成商来识别色谱基线的化合物的色谱峰。集成商必须能够准确地确定峰值开始,顶点峰值,峰值停止。不要过分减少RT窗口,以增加化合物选择性。RT窗口一般不应少于3 x的峰宽基线(例如6秒/ 0.1分钟宽峰基线18秒/ 0.3分钟RT窗口将实际最低)。改善复合识别选择性、调整全局变量>非引用窗口(用于non-ISTD化合物)和全局参考窗口(ISTD化合物)。这将提高拒绝关闭洗脱峰,如果RTs稳定可以设置为小于色谱峰宽(例如6秒/ 0.1分钟宽峰基线稳定RTs 6秒/ 0.1分钟将显著改善拒绝关闭洗脱峰)。

图7。保留时间的设置

8。ISTD设置——对化合物需要ISTD定量,每个复合必须分配一个ISTD(见图8)。

为每个ISTD复合设置类型来ISTD并检查ISTD国旗加上进入ISTD浓缩的。和可选的检查时间参考标记。

为每个化合物需要ISTD定量设置ISTD (ISTD复合名称)。

在图8、化合物CC和弟弟已经设置为ISTD和复合AA组使用复合CC ISTD和复合BB组使用DD ISTD。

图8。ISTD设置

9。浓度设置——设置每个化合物的浓度的校准标准处理。

批表包含校准标准有吗样本类型设置为Cal.和复合方法预期浓度(经验,浓缩的。)进入,然后可以使用该信息可以很容易地创建一个密集的校准表。

点击校准曲线法> >创建水平校准样品(见图9)。IDs的填充水平卡尔。样本类型批表中的行。如果水平ID是一个数字值,它也会填充浓度场。

请注意:对于化合物被ISTD量化,MassHunter定量分析需要精确匹配的所有校准水平id之间non-ISTD化合物及其相应的ISTD化合物。

如果化合物使框不加以控制,那么校准水平将不会包含在校准曲线计算。

图9。创建水平校准样品的选择

如果部分或全部化合物浓度是相同的,那么他们可以通过右击复制到其他化合物校准表并选择本校准水平…(见图10)。

图10。本校准水平…选项

在校准水平复制到对话框中您可以选择一个(点击)或(shift +点击)或更多的化合物选择所有并点击好吧完整的复制所选化合物(见水平图11)。

图11。选择要复制复合校准水平

10。校准曲线的设置-有很多的组合曲线拟合(CF)类型,曲线拟合的起源(CF的起源)和曲线拟合加权(CF重量可用)。默认设置是CF线性的,CF的起源忽略,CF重量没有(见图12)。

请注意:如果您的应用程序只有一个校准水平CF的起源必须设置为力显示一个校准曲线拟合线。

图12。校准曲线的设置

11。全局设置——检查默认设置适用于您的应用程序或实验室协议特别是与下面的量词和限定符集成峰值识别设置(见图13)。

联系窗口决定如果山峰从量词的集成和限定符信号是由于相同的色谱洗脱(即。,设置时间范围限制的比赛保留时间)。默认的单位是分钟2分钟。通常当优化设置为色谱峰宽基线或少基于应用程序或实验室协议。

非参考窗口决定如果山峰从量词的集成和限定符信号是一个可接受的保留期限内(窗口)预期的保留时间或调整预期的保留时间(如果使用时间参考ISTD化合物)。单位是百分比或分钟,默认值为200%。通常当优化这将是一个小的多个色谱峰宽基线或少基于实验室的应用程序或协议。

参考窗口决定如果ISTD峰值的时间设置参考标志从集成ISTD量词和ISTD预选赛信号(窗口)到一个可接受的保留期限内预期的保留时间。单位是百分比或分钟,默认值为80%。通常当优化这将是一个小的多个色谱峰宽基线(通常大于非参考窗口)或少基于实验室的应用程序或协议。

图13。全局设置

12。点击>保存/退出>验证方法的任务——这将检查方法,以确保所有必需的字段是正确地填充。的方法错误列表显示窗口将显示在屏幕底部的错误和警告。所有错误之前必须固定方法可以应用于批处理。列出的这些错误,双击每个线路方法错误列表窗口。方法表中的字段窗口包含错误显示(见图14)。在修复所有错误,点击验证再一次,以确保没有错误或问题的警告。

图14。验证方法