考特尼·瓦茨
克里斯汀为什么比例总是100％？
绝对OCR（PMOL/min）值根据其各自的定义和数学操作转换为依赖性，容量和灵活性的％值。因此，理论上对单个燃料的最大依赖性为100％。
我的依赖性值应该总计100％吗？
如果一个细胞在替代燃料方面具有任何灵活性，它可能会氧化以满足能量需求，那么所有燃料的依赖性将不等于100％。
如果我的灵活性值负值，那意味着什么？
当OCR的变化很小时，变化良好可能会导致负灵活性值。低于5％的负灵活性值通常归因于测定中的噪声。如果您检测到明显的负灵活性，请联系技术支持：cellAnalysis.support@雷竞技raybetagilent.com
如果所有三个抑制剂仅导致总OCR少降低怎么办？
这三种燃料的氧化以外的其他过程可能会导致基线OCR。这些过程可能会进一步分解为线粒体和非明齿剂氧气消耗过程：
- 其他线粒体呼吸：呼吸取决于被氧化以支持线粒体呼吸的替代底物，其中可能包括（但不限于）短和中链脂肪酸和谷氨酰胺以外的中链脂肪酸和氨基酸。
- 非明齿式氧的消耗：细胞中其他生化过程对氧的消耗。这包括（但不限于）非常长的链脂肪酸，它们在过氧化物酶体和其他食用氧气的细胞酶过程中被部分氧化。可以使用Seahorse XF细胞MITO胁迫测试测量总氧气消耗的非分数分数。
如何删除报告生成器中的离群井？
在报告生成器中的数据分析之前，必须删除离群值。有关更多信息，请参见排除异常值的部分。
我无法将数据作为Excel文件导入到报告生成器中进行分析，为什么？
测定结果数据必须从Wave（桌面或控制器）或XFP 1.1软件导出为Excel Workbook文件格式（*.XLSX），然后再导入任何报告生成器。如果Excel文件已从Wave出口，但不能将其进口到报告生成器，请与Seahorse技术支持联系：cellAnalysis.support@雷竞技raybetagilent.com
如果您收到有关仪器协议的错误消息（XFE96; XFE24; XF96;仅XF24）
导入到报告生成器的数据可能是由C引起的USTOM周期在您的仪器协议中。一种自定义周期在仪器协议中指定额外的“混合”或“等待”命令步骤。自定义周期不是XF细胞能量表型测试的标准化测定模板的一部分，并且在报告生成器分析中不支持。如果您还有有关自定义周期的其他疑问，请联系Seahorse技术支持。
如何在此报告生成器中组合多个结果文件？
XF MITO燃料FLEX测试报告生成器可以分析单个测定结果文件。当前不支持报告生成器中的多个结果文件。
什么速率用于计算依赖性，灵活性和容量？
在第4页上描述了用于计算的速率。基线速率定义为第一次注射之前的最后一个速率测量。依赖性和容量率定义为下一次注射之前的最后速率测量。有关XF MITO燃料Flex测试报告生成器中计算的更多信息，请参见参数计算。
这些抑制剂和浓度是否可以与所有细胞一起使用？
是的，该测试在浓度远高于其EC50值的浓度下使用所有三种化合物来抑制哺乳动物细胞。这些值已在许多细胞系和主要分离株中得到验证。尽管大多数细胞类型或细胞系对至少一种抑制剂都有明显的反应，但并非所有细胞都会对所有抑制剂做出反应。如果细胞对特定抑制剂的反应不足，则可能不依赖于该特定的燃料途径（即，对于用于氧化磷酸化的燃料，它们具有灵活性）。
我如何在此测定中解释ECAR和糖酵解？
由于细胞ATP的产生和需求的转移，使用抑制剂的组合可以将ECAR数据的解释与该测试混淆。为了直接测量糖酵解功能，我们建议使用Seahorse XF糖酵解应力测试。
推荐的测定培养基不包括脂肪酸；我可以添加吗？
尽管不需要，但可以将长链脂肪酸添加到培养基中。我们建议在测试外源脂肪酸氧化时，建议使用一种长链脂肪酸，例如海马XF棕榈酸盐-BSA粮农组织。注意：只有长链脂肪酸（例如棕榈酸酯）的氧化对Etomoxir的抑制作用敏感。
更多常见问题解答：细胞分析常见问题解答和故障排除
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