水流动相是微生物生长的成熟条件。这篇文章讨论了防止微生物生长干扰色谱的方法。
选择正确的流动相是开发稳健方法的关键,但良好的流动相卫生也同样重要!
水流动相是微生物的良好滋生地。这些微生物可以导致在流动路径的任何一点堵塞,从泵室到毛细血管到LC柱。其中一些堵塞点比其他堵塞点更容易更换或清除。
这是水流动相放置6个月后的样子
(图片由我的同事Bill提供)
你可能会说,使用移动阶段是疯狂的,但我的同事就见过有人这么做!开玩笑的是,微生物的生长早在肉眼可见之前就会造成问题,所以我们必须采取措施防止它,即使我们只计划使用几天的移动阶段。
减少微生物生长的有效方法是在溶液中加入有机溶剂或叠氮化物等添加剂。对于反相法,初始条件已经包括部分有机溶剂,使流动相a 95/5 H2O/ACN可能是一个合理的方法,但对于100%水溶液色谱,如尺寸排除或离子交换,添加有机溶剂根本不是一个选择。叠氮化物具有剧毒,是一种不受欢迎的解决方案,一些国家和实验室完全禁止使用叠氮化物。
水流动相应通过0.45或0.2 μ m过滤器过滤,以去除微生物和其他颗粒,后所有缓冲盐都已溶解,pH值也已调整。(真的,如果有必要的话,拿出搅拌棒和搅拌器/电炉。)冷藏可以帮助延长寿命长达几周,但在室温水流动相应至少每隔一天重新新鲜。作为一个额外的测量,你可以加上管路过滤器到LC系统,或在泵和自动进样器之间,或在柱之前,这取决于你是否想过滤样品。
下次见!
安妮
关键词:生物柱,LC,流动相,最佳实践