流动相的高效液相色谱-水的最佳实践

水移动阶段微生物增长的时机已经成熟。这篇文章讨论了防止微生物生长的方式干扰你的色谱法。

选择正确的移动阶段可以开发一个健壮的方法的关键,但良好的流动相卫生同样重要!

水移动阶段微生物是伟大的温床。这些微生物可能导致堵塞在任何时候流的路径,从泵室到毛细血管LC列。一些点的阻塞比其他人更容易更换或清理。

这里有水流动相是什么样子的时候离开坐6个月:

(照片由我的同事比尔)

你可能会说你会疯狂的流动相使用,但是我有同事看到人们这样做!除了开玩笑,微生物增长将导致问题之前它变得肉眼可见,因此我们必须采取措施阻止它甚至为移动阶段我们只计划使用几天。

减少微生物增长的有效方法包括有机溶剂或添加剂如叠氮化解决方案。为反相方法的初始条件已经包含部分有机溶剂,使流动相95/5 H₂O / ACN可能是一个合理的方法,但是对于100%的水像大小排斥或离子交换色谱法,添加有机溶剂根本没有一个选项。叠氮化是剧毒,一个没有吸引力的解决方案,和一些国家实验室完全禁止其使用。

水移动阶段应该是0.45或0.2µm过滤器过滤去除微生物和其他微粒,后所有缓冲盐溶解和pH值调整。(真的,离开酒吧和搅拌器搅拌/电炉如果必要的话)。制冷可以帮助延长寿命长达几个星期,但在室温水流动相应该重塑新的至少每隔一天。作为一个额外的措施,你可以添加一个管路过滤器LC系统,泵和autosampler之间或列前决定是否你想过滤样品。

直到下次!

安妮

关键词:Biocolumns、LC、移动阶段、最佳实践