有时子2微米粒子不是灵丹妙药,另一列更好是什么时候?
你好了!本周我们有篇文章来自我的同事,迈克。迈克是我们的一个领域应用科学家们花很多时间帮助客户选择列和优化和解决它们的方法。当我要求他写一篇文章,他把下面这篇文章的标题“教训平均色析法,”然而迈克一点也不!他来生物分子分离GPC,使他特别好的挑战秒或大分子样品。这就是迈克必须与我们分享:
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找到这个问题的答案,我领导下来范德姆特方程的路径:在任何一天,表面上多孔粒子(SPP)可以为今天的进步提供强有力的竞争子两个微米(STM)静止阶段,因为它适用于解决。对于那些可能不熟悉SPP列,这个概念很简单。相比完全多孔固定相,SPP列是由薄多孔的固体硅芯外层,允许快速传质。我一直意识到附近的SPP列能够产生UHPLC性能好处的反压力低,通常在400酒吧范围。但是我最近质疑为什么在今天的1200岁酒吧LC仪器做这么多列供应商位置SPP解决方案在STM大生物分子分离?
表面多孔粒子与一个坚实的核心
找到这个问题的答案,我领导的路径范德姆特方程:
板的高度(H)是一个函数的线速度(u)和B和C是由涡流扩散常数描述频带展宽,纵向扩散和传质阻力分别。
SPP列固定阶段第一个概念时,目标应用程序确实是大生物分子和提高分辨率。关注范德姆特方程放在C常数或传质阻力。在2000年代早期,缩短传质距离使用薄多孔层被证明产生巨大的结果对于大型和小型的分子相似,因为它应用于尖锐的峰形状。这主要是由于比较反对完全多孔~ 3µm材料。然而,短十年后高效液相色谱仪器技术的进步导致仪器能够处理更高的反压力,并沿着这个乐器设计的崛起sub-2-micron粒子开始。当SPP列比较短的质量传递路径的STM列,结果类似如果不是更好的小分子在STM新技术。然而,更大的生物分子SPP列仍然保持他们的优势。问题是,为什么?
我学到了什么是范德姆特方程是一个常数C项组成的两个电阻transparticle转让(或孔的深度的)以及颗粒间的转移(或流动相薄层覆盖的影响粒子的内外表面)。小分子似乎并没有不利影响的这个粒子间的阻力更大的分子。因为SPP孔深度小于完全多孔STM列,减少内部表面积与流动相层。这意味着溶剂层传质效果是减轻,允许更高的分辨率在分析大型生物分子SPP列。
最后,我的建议是,在分析大生物分子别那么迅速抓住一个STM列。虽然很容易最大化你UHPLC投资利用STM列,SPP可能产生更好的峰形状和更大的分辨率。这也是与所有我们喜欢SPP,如低收益率反压力仪器平台的灵活性和较大的熔块毛孔,防止堵塞和列寿命更长。随着技术的不断发展对表面多孔粒子,大分子分离的未来现在看起来更令人兴奋。这是因为,由于他们SPP可以容纳更大的实芯大小大孔隙大小450,最大化可用的表面积进一步推动决议。
表面上的一个例子多孔粒子导致更高的分辨率大生物分子
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关键词:生物列,液相色谱,提示和技巧,列选择、蛋白质分离、AdvanceBio博客