小费准备可靠的和一致的移动阶段

一直准备移动阶段是一致的色谱结果的关键。的顺序操作可以不仅仅是数学问题。

方法一样健壮的每个组件,其中包括移动阶段。准备移动阶段可能看起来很简单,通常是,但有时你如何真的很重要。

与HILIC特别是,一个很小的流动相组成的变化可以有很大的影响。看下面的色谱图中,您可以看到,只有1%流动相组成的变化可以导致大的保留时间的变化。

权力平等主义的甲苯的分离、胞嘧啶和尿嘧啶混合用于QC AdvanceBio花女士媒体列上。

如果你看的方法用户指南或应用注释为AdvanceBio女士花了媒体两性离子HILIC列列,您会注意到,移动阶段通常写如下:

流动相200毫米= 10%甲酸铵在水中的pH值3,90%的水分

移动阶段B = 10% 200毫米甲酸铵在水中的pH值3,90%乙腈

最后的盐浓度为20毫米。

是完全合理的看看这个,认为,“为什么我不做20毫米甲酸铵在水中呢?”

有几个原因使移动阶段如上所述,在200毫米股票甲酸铵溶液(或盐你使用),然后稀释10倍与水或乙腈为移动阶段a和B,分别。

• 盐通常用于HILIC很容易溶解在水中,但在乙腈的溶解度有限,所以准备股票水溶液最小化任何溶解性的挑战。
• 从股票的解决方案,然后小心翼翼地稀释,确保移动阶段都有相同的离子强度。我们要避免添加一个离子交换HILIC分离效果。
• 最后一个原因很简单方便。它更快,更容易让人集中盐溶液,过滤它,并将它存储在冰箱里,比两个单独的反复移动阶段。过滤和冷藏盐解决方案往往会保持几周,很容易。

最近我收到一个客户他们的实验室准备HILIC移动阶段——他们做重量分析地称量出溶剂除盐。这是另一个伟大的非常一致的流动相制备方法。

最后一点——虽然HILIC机制并不十分清楚,它取决于分区的一个分析物在固定相表面的水层。建议总是有至少3%的水分保持水层。包括有机水流动相(在上面的示例中10%)保证充足的水。

这就是这个星期。我们将进一步讨论溶剂对HILIC下次分离。

说话很快,

安妮

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