信用证翻译方法——住体积

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LC,住卷在液相色谱柱头混合器的体积。在两泵系统用高压混合住卷标有黄色框:

在一个比例阀泵低压混合系统是不同的,它的标志黄色框:

在权力平等主义的运行,住体积对分离没有影响。

在梯度系统中,当有重大影响或翻译方法转移到另一个列或系统。至少是这样的住卷两个系统是不同的。牢记住卷是一个额外的死体积和影响当到达柱头梯度变化。住体积较大,需要到达的时间越长,柱头。

两种可能的情况:

系统1的住体积大于系统的住卷2:
在这种情况下,梯度变化到达系统2的列头比预计的还要早。得到类似的色谱比在系统1你必须添加一个额外的权力平等主义的持有时间的开始分析运行来补偿这种影响。
系统1的住体积小于系统的住卷2:
在这种情况下,梯度变化到达系统的柱头2比预期晚。得到一个类似色谱比系统1你必须先启动运行没有注射,必要的补偿时间后(预先灌浆法时间)你注入。

这是一个图形化的例子如何原始梯度住量改变时需要调整。流= 1毫升/分钟和住卷1或2毫升保持它的简单性:

蓝色是原始梯度,橙色的一个权力平等主义的保持时间(住卷1 >住卷2)和绿色是预先灌浆法时间(住卷1 <住卷2)。所有三个梯度的三个系统会显示相同的色谱图。

对于这个计算,系统需要的列,取而代之的是一个非常低的卷管,最好15µL或者更少的内部体积。溶剂是水和溶剂B是水溶剂丙酮或其他防紫外线的0.1%。丙酮具有紫外线吸收265 nm和探测器将看到越来越多的丙酮。

开始一个梯度从100%到100%(梯度时间t B在任何时间_梯度),记录色谱图。

方法1:

画一个切线通过色谱的拐点,这条线相交的时间与基础信号线是停留时间。
方法2:

梯度时间而闻名。半高和低基线之间的距离。50%的高程点让线平行于基线相交色谱。这个交点的时候是t_50%。住时间t_50%- 0.5·t_梯度。

对于这两种方法,停留时间乘以体积流的住。

不要混淆与住死体积体积。——体积的死体积只有部分从注射器列头。