知道博士色谱中的动态效应
CSD全球技术支持技术经理Norbert Reuter，荷兰米德尔堡
色谱中的动态影响是色谱艺术中被遗忘的章节之一。我们经常假设注射的组件在分离过程中保持不变，但这并不总是正确的。有时在分离过程中可能会发生化学反应或异构化。
让我们看一下化学中的古典教科书示例 - 乙酰丙酮。
图1：
log p，n-二二醇（Acolol和疏水相）和水（极相）之间的分区系数表示两个不混溶阶段中成分的浓度。在我们的情况下，乙酰丙酮分区的酮形式以8:10的比例为8:10，但烯醇形式的比率为10：4。
如果我们在没有任何分子内转化率的情况下注入两个组件，在等含量条件下，烯醇形式将具有更长的保留时间。它更疏水，因此与疏水性C18相相比，它比早期的相互作用更多，从而消除了更多的极性酮形式。不幸的是，我们无法冻结两个组件之间的平衡，因此我们的色谱图将在不同的保留时间显示两个峰，而两者之间的鞍座（图2）：
图2：
在图2中，两个峰的高度和表面积相等，这表示1：1的酮和烯醇形式之间的平衡比。鞍座来自分离过程中从一种形式的分析物到另一种形式（反之亦然）的连续转换。
所有可逆反应，例如异构化和互变异构，都可以证明鞍色谱图。在气相色谱法中，通常与载气无相互作用，因此任何反应都必须是内部反应。在HPLC中，例如，流动阶段可能会影响质子和/或水的供体功能或受体功能。
气相色谱示例：
图3：
图3显示了C1- C6碳氢化合物混合物，在CP-AL2O3/KCL柱上进行了分析。峰值在6分钟和13.6分钟的峰值保留时间显示典型的鞍形式。该反应是从丙烯到甲基乙烯（丙烯）的异构化，反之亦然（见图4）：
图4：
在这种情况下，其他碳氢化合物在两个组件（保留时间8至13.2分钟）之间洗脱了“鞍座上”。
当对多孔聚合物（催化作用）分析时，GC中动态效应的另一个例子是甲醛。甲醛对三动烷进行了修剪（见图5），色谱图显示了2个峰。在液体固定相的较厚膜上，例如CP-SIL 5 CB或VF-1MS甲醛保持单体，并且可以进行量化。
图5：
在GC中，是蒸发样品和气相反应，它们取决于压力。压力越高，反应越多地转移到较低体积分量的侧面。在我们的案例中，甲醛的三个分子仅反应于三个分子的三人烷，因此甲醛的部分压比三动烷的部分压高3倍。这意味着在高头压力的开始时，对三干烷的反应是有利的，但是在环境压力（甚至在MS系统中甚至较低的情况下）的结束时，回反应回到甲醛是主要路径。两个组件之间的比率沿GC柱中的压力梯度变化。
液态色谱示例：
图6：
图6显示了二肽Gly-GLU的RP-SCX列上不同pH的3个运行。Gly-Glu经历环化反应（见图7），水损失取决于洗脱液的pH（绿色：pH = 3.7，，，，红色：pH = 3.9，，，，蓝色：pH = 4.1）
图7：
概括
色谱图中的一对奇怪的峰形可能来自动态效应。“动态效应”是指一个成分与另一个组件的各种可逆反应，包括异构化，双键的转移，凝结或寡聚。动态效应的典型是所讨论的两个峰的“鞍形”形状 - 一个带有尾巴的峰，另一个带有边缘的峰（图2）。
