狭窄的斯托克斯变化

尊敬的先生/Mike Picollelli

谢谢您的回复

我已经使用了5个激发和排放带宽，我认为这足以发挥某些光谱分辨率，但不幸的是，先前讨论的狭窄的Stokes Shift

因此，我尝试了不同的激发波长，即使它几乎没有损害敏感性并已经得到令人满意的stokes变化，但是由于这两种化合物的结构非常紧密，在激发了带有波长210 nm的两种化合物时，我得到了相同的发射波长（大约280NM）对于两种化合物，然后我尝试以同步模式将它们分开，并成功地通过第一个衍生同步分别分别分开每个化合物，并获得了我可以在没有彼此干扰的情况下量化每个的相交

最后，我尝试了相同的同步参数，但在两种化合物的混合物中一起在同一溶液中一起使用。不幸的是，混合物中的两个光谱覆盖了，到目前为止，我还没有解决方案

我的最后一个问题是PMT电压的确切作用以及何时使用此选项？？？

再次感谢。等待您的帮助和反馈，

萨拉

你好萨拉加拉尔；

对于回答您的问题的延迟，我深表歉意。希望答案有帮助。

1-在存在这种重叠的情况下，这些发射波长可以用于化合物定量（检测器的激发和发射波长之间的干扰风险）吗？

这些波长（即280/290 nm和300/304 nm）确实非常接近。凭借大多数荧光带的广泛本质，我相信总是会有一定程度的重叠。可以通过选择非常低的SBW（光谱带宽）值来最小化。降低SBW将改善扫描的分辨率，但是信号与噪声比将略有损失。

2-如果没有，可以采取什么工具操作来解决这个问题，以在两个光谱之间获得更好的分离（激发和发射）？

假设峰原生的狭窄以至于可以解决，降低SBW值可以改善峰的分辨率和分离。本质上，许多来自荧光事件的峰值非常广泛。

最好的祝福，

麦克风