我分析两种化合物表现出较高的波长的激发光谱重叠和下波长的发射光谱(一个复合激发波长为280 nm和发射波长为300 nm),另一个与激发波长为290 nm和发射波长为304 nm
我有两个问题:
1 -这些发射波长可用于化合物量化存在的重叠(风险之间干扰的激发和发射波长检测器)? ?
2 -如果不是,是仪器操作,可以做些什么来解决这个问题,以实现更好的分离两个光谱(激发和发射)? ?
你好saragalal;
很抱歉延迟回答你的问题。我希望答案有帮助。
1 -这些发射波长可用于化合物量化存在的重叠(风险之间干扰的激发和发射波长检测器)? ?
这些波长(即280/290和300/304 nm)确实很近。最广泛的性质的荧光乐队,我相信总是会有一定程度的重叠。这可以减少通过选择一个非常低的南偏西(光谱带宽)的价值。降低南偏西将提高分辨率的扫描,但信噪比就会受到影响。
2 -如果不是,是仪器操作,可以做些什么来解决这个问题,以实现更好的分离两个光谱(激发和发射)? ?
降低了南偏西值可以提高分辨率和分离的山峰,假设山峰本身狭窄足以得到解决。许多山峰源于荧光事件相当广泛的天性。
最好的问候,
迈克
亲爱的先生/迈克Picollelli
谢谢你的回复
我已经使用5的激发和发射带宽我想足以发挥某些光谱分辨率,但不幸的是前面讨论的狭窄的斯托克斯位移
所以我试着不同的激发波长,即使将小妥协敏感性和已经得到了满意的斯托克斯位移,但由于两种化合物的结构非常接近,在激动人心的波长210纳米的两种化合物,我得到同样的发射波长(大约280海里)这两种化合物,然后我想分开它们在同步模式下,成功分离每一个单独的一阶导数同步和相交,我可以量化每一个没有其他的干扰
最后我试着相同的同步参数,但在这两个化合物的混合物在相同的解决方案。不幸的是,两个光谱覆盖混合物,这一点我没有解决方案
我的最后一个问题的确切作用PMT电压和何时使用此选项? ? ?
再次感谢。等待你的帮助和反馈,
莎拉
亲爱的先生/迈克Picollelli
谢谢你的回复
我已经使用5的激发和发射带宽我想足以发挥某些光谱分辨率,但不幸的是前面讨论的狭窄的斯托克斯位移
所以我试着不同的激发波长,即使将小妥协敏感性和已经得到了满意的斯托克斯位移,但由于两种化合物的结构非常接近,在激动人心的波长210纳米的两种化合物,我得到同样的发射波长(大约280海里)这两种化合物,然后我想分开它们在同步模式下,成功分离每一个单独的一阶导数同步和相交,我可以量化每一个没有其他的干扰
最后我试着相同的同步参数,但在这两个化合物的混合物在相同的解决方案。不幸的是,两个光谱覆盖混合物,这一点我没有解决方案
我的最后一个问题的确切作用PMT电压和何时使用此选项? ? ?
再次感谢。等待你的帮助和反馈,
莎拉