Agil雷竞技raybetent Seahorse XF分析仪如何工作

实时自动测量能量代谢

Seahorse XF分析仪测量多孔板中活细胞的氧消耗率（OCR）和细胞外酸化率（ECAR），询问关键细胞功能，例如线粒体呼吸和糖酵解。XF分析仪执行复合添加和混合，无标签分析检测以及实时对OCR和ECAR的自动测量。

OCR和ECAR速率是线粒体呼吸和糖酵解的关键指标，这些测量结果为培养细胞和EX-VIVO样品中细胞代谢功能的系统级别视图提供。有关选择适合您的测定的更多信息，请访问我们XF仪器选择指南。

雷竞技raybetAgilent Seahorse XF分析仪以大约5-8分钟的间隔测量氧消耗率（OCR）和细胞外酸化速率（ECAR）。OCR是线粒体呼吸的指标，ECAR主要是糖酵解的结果。

OCR和ECAR的实时测量是通过隔离微孔板单层上方的细胞单层上方的极小体积（约2μl）的实时测量。

细胞氧的消耗（呼吸）和质子排泄（糖酵解）在此“瞬态微塑料”中迅速，易于测量的溶解氧和游离质子的浓度变化，每隔几秒钟就通过固定状态传感器探测在固体状态传感器探测器上方进行每隔几秒钟测量，这些固体传感器位于固体传感器探测器上方。单层。该仪器测量浓度2-5分钟，然后分别计算OCR和ECAR。

测量完成后，探针提升，使上面的较大培养基与瞬态微型室中的介质混合，从而将细胞值恢复为基线。一个集成的药物输送系统允许在用户定义的间隔下连续添加多达四种化合物。

在XF分析开始之前，将细胞接种到XF细胞培养物板条的孔中。提供海马，无碳酸氢盐培养基在测定过程中使用。在测定过程中，最多可将多达四种药物添加到测定弹药筒中进行自动注射。首先将测定墨盒放入分析仪中，以自动校准光学传感器。接下来，将细胞培养板插入仪器中。

通常，在通过药物输送端口添加抑制剂，刺激剂，底物或化合物之前，将基线（基础）OCR和ECAR速率测量三次或四次。OCR以PMOL/MINUNE和ECAR单位为单位，以MPH/分钟为单位。然后将已预加载到测定弹药筒的药物输送端口的化合物被气动注射到每个井中的介质中。温和混合后，进行多次OCR和ECAR测量。

因为Seahorse XF测量值无损，因此可以反复测量同一细胞种群的代谢率

随着时间的流逝，将多达四种不同的药物顺序注入每个孔中。总测定时间通常为60至90分钟。完成XF分析后，可以在同一板上进行其他类型的生物测定，例如细胞活力。为了维持正常的细胞生理，温度控制系统将细胞环境保持在37°C（或其他预设温度）。

Seahorse消耗品是专门用于Seahorse XF分析仪的。它们提供了敏感的，动力学的测量，以同时分析两种主要的代谢能途径：线粒体呼吸和糖酵解。

Seahorse XF Fluxpaks包括传感器墨盒，组织培养板，镇静剂和实用程序板进行校准。传感器墨盒包含用于检测细胞培养基中氧气和质子水平的固态传感器探针。它们还具有集成的注射端口，用于在测定过程中引入刺激，抑制剂和底物，从而可以实时监测瞬时细胞反应。XF组织培养板以8孔，24孔和96孔格式提供。专门的细胞培养板是针对球体和胰岛设计的。每一个XF Fluxpaks和文化板均受100％的质量控制，以表现性能和一致性。

Seahorse XF套件，试剂和媒体设计用于使用XF分析仪和XF Fluxpaks进行广泛的测定，以研究一系列细胞功能，包括代谢表型，ATP产生，线粒体功能，脂肪酸氧化和实时的糖酵解。它们是标准化的，优化的开放式产品，可以实现一致的结果，降低测定的复杂性并提高研究生产率。每批产品经过严格测试并用细胞进行验证，以提供高性能和低次型变化。连同Agilent的出色技术雷竞技raybet支持，这些套件，试剂和媒体将大大增强您执行XF分析的整体体验。