启动延迟校准导航器
延迟校准导航器是可用的如果你有一个LC馏分收集器模块配置。访问延迟校准导航器,
- 单击延迟校准选项卡的收购。
- 点击启动延迟校准。
运行延迟校准,必须创建一个方法,识别所有的模块,包括校准系统,包含以下信息:
- 样品信息(位置、名称等)
- 设置信息和运行的每个模块(取样器、泵、检测器等)。
- (可选)跑后命令关闭水泵,避免不必要的溶剂消耗
应该执行延迟校准过程与方法设置尽可能接近目标应用程序,以避免潜在的问题。建议使用相同的流调制器设置(分裂模式)在目标应用程序以避免意想不到的问题。在探测器的信号太小(s)的分流,分屏模式必须适应值接近模式1。
重要:延迟时间(s)和测量的体积(s)探测器在分离流动的有效期仅为这主要和化妆流动。只有校准延迟时间(s)和体积(s)探测器的主要流将重新根据实际的流量。
校准使用延迟和结帐calibrant不能isocratically执行。一些染料混合物不能正常洗提列在一个高比例的使用有机溶剂。这是一个特定效果的磺化染料分离高表面积列,这是典型的制备色谱。
在第一次运行之前,冲洗列有三个列卷使用95%的有机通道B(约2分钟)。
注入量
下表列出了建议calibrant不同列的默认注入卷直径。如果需要,调整注入体积的情况下,最终响应探测器或馏分收集器延迟传感器饱和或过低。
| 柱内径 | Calibrant注入体积 |
| 3.0毫米 | 0.5μL |
| 4.6毫米 | 1μL |
| 大约10毫米 | 10μL |
| 大约20毫米 | 50μL |
| 30毫米 | 100年μL |
| 50毫米 | 300年μL |
如果系统包含一个1290无穷II制备开设取样器/收集器(G7158B),切换操作模式制备取样器的方法。从方法预设列表,选择的预设非极性样本矩阵。在右边的塞设置,提供一个位置瓶25%甲醇在水里,是post-sample塞溶剂。保留所有其他参数默认设置。
流量
LC系统已经交付至少有一个毛细管组件设计在一定流量范围。根据安装的毛细血管,以下的列和流速组合推荐。
| 柱内径 | 流量范围 | 列了与系统 |
| 3.0毫米 | 0.4 - -0.6毫升/分钟 | 3.0×50毫米,2.7μm (699975 - 302) 2.7或3.0×150毫米,μm (693975 - 302) |
| 4.6毫米 | 1.0 - -1.5毫升/分钟 | 4.6×100毫米,2.7μm (695975 - 902) |
| 大约10毫米 | 4 - 8毫升/分钟 | 10×50毫米,5μm (446905 - 802) |
| 大约20毫米 | 15 - 40毫升/分钟 | 21.2×50毫米,5μm (446905 - 702) |
| 30毫米 | 40 - 80毫升/分钟 | 30×50毫米,5μm (446905 - 302) |
| 50毫米 | 80 - 200毫升/分钟 | 50×50毫米,5μm (446905 - 502) |
梯度
推荐使用以下梯度与50毫米长列包含在制备规模系统毛细管板。如果再列用于校准,延长斜率时间梯度的一个适当的因素。梯度适用于任何列的内径,只要流量相应地调整。
| 时间 | 组成一个 | B组成 |
| 预处理时间:1.5分钟 | ||
| 0分钟 | 90% | 10% |
| 0.5分钟 | 90% | 10% |
| 4.0分钟 | 5% | 95% |
| 6.0分钟 | 5% | 95% |
| 6.1分钟 | 90% | 10% |
| 停止时间:7.0分钟 | ||
以防色谱显示峰值或峰值加入到峰样乐队,开始尝试增加成分从10%降至20%。
检测
| 紫外线 | 使用一个波长的310毫米(没有参考波长)延误calibrant监控这三个化合物。 |
| 默沙东公司 | 扫描和SIM卡可以用于校准模式,这取决于个人喜好。 在积极的电离模式中,监控离子m / z [m + H) + 545.2, 567.2 (m + Na) + 589.2 (mh + 2 Na) + 273.1 (m + 2 H) 2 +。 在消极的电离模式中,监测离子543.2 m / z (mh) -。 |